欢迎访问pokerking安卓版官网

乐桂堂家具

厂家直销 质量可靠 诚信经营

让广大养殖户用得放心、平价、优良。

18169824988 18029287672

当前位置:主页 > 新闻资讯 >

返回列表页

菌粉、半成品以及成品为散剂和颗粒剂的可直接

  声明:百科词条人人可编辑,词条创建和修改均免费,绝不存在官方及代理商付费代编,请勿上当受骗。详情

  微生态活菌制品系由人体内正常菌群成员或具有促进正常菌群生长和活性作用的无害外籍细菌,经培养、收集菌体、干燥成菌粉后,加入适宜辅料混合制成。用于预防和治疗因菌群失调引起的相关症状和疾病。微生态活菌制品必须由非致病的活细菌组成,无论在生产过程、制品贮存和使用期间均应保持稳定的活菌状态。它可由一株、多株或几种细菌制成单价或多价联合制剂。根据其不同的使用途径和方法可制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂等多种剂型。

  微生态活菌制品的制备方法、工艺应能保证成品含有足够的活菌数量,保持其稳定性,同时应防止外源因子的污染。

  生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

  选用的生产用菌种应来自人体内正常菌群,或对人体无毒无害、具有促进正常菌群生长和活性作用的外籍细菌。细菌的分离过程和传代背景应清晰,应具备稳定的生物学和遗传学特性,并能保持稳定的活菌状态,经实验室和临床试验证明安全、有效。

  生产用菌种应按照“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定建立种子批系统。三级种子批应分别冻干,置适宜温度保存;种子批传代应限定传代次数,原始种子批和主种子批启开后传代次数不得超过10代,工作种子批启开后至发酵培养传代次数不得超过5代。3.种子批的检定

  菌种的属、种型分类鉴定,应依据最新版伯杰氏细菌系统鉴定手册(Bergeys Manual of Systematic Bacteriology)和伯杰氏细菌命名手册(Bergeys Manual of Determinative Bacteriology)的有关规定进行,包括形态、生长代谢特性检查。原始种子或主种子还应做遗传特性和抗生素敏感性等检查。

  应包括种子液制备、大罐培养、收获菌体(或芽孢)和菌体干燥制成菌粉。如生产多价制品时,应每种菌分别培养,制备单价菌粉。

  启开工作种子批菌种,接种子适宜培养基进行多级种子扩增,应涂片做革兰氏染色,在显微镜下观察5~10个视野,细菌的染色反应、形态应一致并符合原始菌种的特征。制备过程应防止污染,菌种传代次数应符合规定。

  采用液体培养。将种子液置适宜条件下培养(包括厌氧或需氧、温度、时间等),培养过程中取样涂片做革兰氏染色镜检、pH值检测等,芽孢菌需进行芽孢形成率的检测,均应符合规定。培养结束后取样做纯菌检查,如发现污染应予废弃。

  培养结束后离心收获湿菌体,与适宜的分散剂、稳定剂混合。采用真空冷冻干燥法干燥菌体,芽孢菌可采用加热干燥方法,再经粉碎、过筛制成粉末状菌粉。

  同一工作种子批菌种生产的最多2批单价菌粉可按批准的比例与辅料混合均匀后制成半成品。配制多价制品时,应将各单价菌粉、辅料按配方比例和配制程序混合均匀,配制过程应防止污染。

  根据制品的用途、使用对象和用药途径等因素确定剂型。制备过程应符合2010年版药典三部附录Ⅰ 制剂通则”项下相关剂型的规定。

  成品批号应在半成品配制后确定,配制日期即为生产日期。同一批号的制品,应来源一致、质量均一,按规定要求抽样检验后,能对整批制品作出评定。应根据验证结果,规定半成品的分装时间,如超过24小时,应分为不同的亚批。

  制品的分装应符合2010年版药典三部附录Ⅰ 制剂通则”的有关规定。包装应符合“生物制品包装规程”的有关规定。规格应符合批准的规格要求。

  取少量菌粉加入适量灭菌生理氯化钠溶液或其他适宜稀释液后,涂布在适宜琼脂平皿上,在适宜条件下培养,其培养物的生长特性和染色镜检的特征应符合生产用菌种特征。

  菌粉中残余水分的含量会直接影响活菌的生存,须进行菌粉干燥失重的检查。应按2010年版药典三部附录Ⅶ L或仪器方法测定。

  半成品须做杂菌检查,根据用药途径确定杂菌检查的质控指标。方法和结果判断见本总论附录3。

  检查成品中所含的目的菌是否符合生产用菌种的特性。即按上述“种子批的检定”方法进行生长特性、染色镜检和生化反应检查,应符合规定。对于多价制品,则须逐一检查单价菌特性。

  片剂外观应完整、光洁,呈白色或类白色,间有菌粉色斑;颗粒剂、散剂和胶囊剂内粉末的粒子大小、色泽应均匀,间有菌粉色斑。

  按2010年版药典三部附录Ⅶ L或仪器方法测定,减失重量应不得超过5.0%,芽孢菌制品应不得超过7.0%。

  按2010年版药典三部附录Ⅴ G第二法,采用单筛分法或双筛分法检查,应符合规定。

  各剂型按2010年版药典三部附录Ⅰ 制剂通则”的相应规定进行,应符合规定。

  按本总论附录2方法测定每克制品中的活菌数,应符合规定。多价制品应分别测定各单价活菌数。

  安全试验是通过动物试验进行的非特异性毒性检查,应根据制品的使用途径和人用剂量确定试验方法。

  称取2g制品,加入8ml生理氯化钠溶液中,混合均匀。用5只体重18~22g小鼠,每只小鼠经口灌胃0.5ml,每天1次,连续3天。自第1天灌胃起,连续观察7天,小鼠应健康存活、体重增加,判为合格。如不合格,可另选10只小鼠复试1次,判定标准同前。

  用24~26g雌性小鼠5只,每只小鼠阴道内置入10mg制品,每天1次,连续3天。自给药第1天起,连续观察7天,小鼠应健康存活、体重增加,阴道局部无红肿、分泌物等症状,判为合格。

  无菌称取3.0g制品或菌粉(胶囊取内容物),加入27.0ml稀释液中,充分摇匀,做10倍系列稀释(最终稀释度根据不同的指标要求而定)。取最终稀释度的菌液100μl,滴人选择性琼脂培养基平皿上,共做3个平皿,并以玻棒涂布均匀,置适宜条件下培养,到期观察每个平皿菌落生长情况,并计数。当平皿菌落数小于10或大于300时,应调整最终稀释度,重新测定。根据3个平皿菌落总数按下列公式计算活菌数:

  (3)选择性琼脂培养基,是指最适宜制剂(或菌粉)中活菌生长的培养基。须经批准后方可使用。

  微生态活菌制品杂菌检查法系检查微生态活菌制品的菌粉、半成品及成品受外源微生物污染程度的方法。检查项目包括控制菌检查,非致病性杂菌、真菌计数。

  杂菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作,防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

  检验量,即一次试验所用的供试品量(g)。检验时,应从2个以上最小包装单位中随机抽取不少于3倍检验用量的供试品。

  菌粉、半成品以及成品为散剂和颗粒剂的可直接称取备用;成品为片剂、胶囊剂的需研碎后备用。

  控制菌检查用的培养基,即成品培养基、由脱水培养基或按培养基处方配制的培养基,均应进行培养基的适用性检查。检查项目包括促生长、指示和抑制特性能力。

  试验所用的菌株传代次数不得超过5代(从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第-代),并采用适宜的菌种保藏技术,以保证试验菌株的生物学特性。

  大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC (B) 44102]

  金黄色葡萄球菌(Staphylacoccus aureus) [CMCC(B) 26003]

  乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B) [CMCC (B) 50094]

  铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [CMCC (B) 10104]

  生孢梭菌(Clostridium sporogenes) [CMCC (B) 64941]

  白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC (F) 98001]

  痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae) [CMCC (B)51252]

  接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基或营养琼脂培养基中,接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中,培养18~24小时;接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中,培养24~48小时。用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10~100CFU或100~1000CFU的菌悬液。

  菌悬液制备后应在2小时内使用,若保存在2~8℃的菌悬液可以在24小时内使用。

  (1)增菌培养基促生长能力检查 分别接种不超过100CFU的试验菌于被检培养基和对照培养基中,在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。与对照培养基比较,被检培养基试验菌应生长良好。

  (2)固体培养基促生长能力检查取试验菌各0.1ml(含菌数50~100CFU)分别涂布于被检培养基和对照培养基平皿中,每种培养基平行制备2个平皿,在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。被检培养基与对照培养基相比,生长的菌落大小、形态特征应一致。

  (3)培养基抑制能力检查 接种不小于100CFU的试验菌于被检培养基中,在相应控制菌检查规定的培养温度及最长时间下培养,试验菌应不得生长。

  (4)培养基指示能力检查 分别接种不超过100CFU的试验菌于被检培养基和对照培养基平皿上,在相应控制菌检查规定的培养温度及时间下培养。被检培养基中试验菌生长的菌落形态、大小、指示剂反应情况等应与对照培养基一致。

  阳性对照试验 供试品进行控制菌检查时,应做阳性对照试验。取阳性对照菌于相应选择性培养基平皿上划线接种,按供试品的控制菌检查方法培养,观察菌落生长情况。阳性对照试验应检出相应的控制菌。

  阴性对照试验 取增菌液0.1ml,照相应控制菌检查法检查,作为阴性对照。阴性对照应无菌生长。

  (1)增菌培养 称取供试品1g,加到9ml灭菌胆盐乳糖培养基中,培养18~24小时。

  (2)特异培养 将上述增菌液摇匀,取0.1ml滴加到曙红亚甲蓝琼脂平皿上,以玻棒涂匀,一式3份,培养18~24小时,观察菌落生长情况。

  (3)结果判定 阳性对照平皿应长出紫黑色、圆形、稍凸起、边缘整齐、表面光滑、带有金属光泽的菌落。供试品平皿上若未见菌落生长或生长的菌落与阳性对照的菌落形态特征不符,判供试品未检出大肠埃希菌;若生长的菌落与阳性对照的菌落形态特征相符或疑似,应做革兰氏染色镜检等适宜的鉴定试验,鉴别是否为制品中的目的菌或大肠埃希菌。

  大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC (B) 44102]

  金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)[CMCC (B) 26003]

  枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[CMCC (B) 63501]

  白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC (F) 98001]

  菌液制备 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基或营养琼脂培养基中,培养18~24小时;接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中,培养24~48小时。上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50~100CFU或500~1000CFU的菌悬液。菌悬液制备后应在2小时内使用,若保存在2~8℃的菌悬液可在24小时内使用。

  适用性检查 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌菌液各1ml(含50~100CFU),分别注入无菌平皿中,立即倾注营养琼脂培养基。每株试验菌平行制备2个平皿,混匀,凝固,置30~37℃培养48小时,计数;取白色念珠菌液1ml(含50~100CFU),注入无菌平皿中,立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基,每株试验菌平行制备2个平皿,混匀,凝固,置20~28℃培养72小时,计数.或采用涂布法,取上述菌液各0.1ml(含菌数50~100CFU),分别涂布于相应琼脂培养基平皿上,以玻棒涂布均匀,一式2份,同法培养,计数。同时,用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。

  结果判定 被检培养基的菌落平均数与对照培养基的菌落平均数相比大于70%,且菌落形态、大小应与对照培养基上的菌落一致,判该培养基的适用性检查符合规定。

  照无菌检查法(2010年版药典三部附录Ⅻ A)和微生物限度检查法(2010年版药典三部附录Ⅻ G)中“培养基及其制备方法”的处方制备,未收录的培养基可按照以下配方配制,也可使用按该处方生产的符合要求的脱水培养基。配制后,应采用验证合格的灭菌程序灭菌。

  杂菌检查的限度标准是基于药品的给药途径和对患者健康潜在的危害以及活菌制品的特殊性而制订的。

pokerking安卓版

返回顶部